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TRAP染色

更新時間:2024-09-26

簡要描述:

TRAP染色是用于檢測骨組織、骨細胞中特征物質的染色,使破骨細胞呈紅色,背景呈綠色或藍色??咕剖崴嵝粤姿崦?Trap)為破骨細胞的標志酶,特異地分布于破骨細胞中,為破骨細胞所*,通常作為鑒別破骨細胞的重要標志物。

     alp堿性磷酸酶染色服務技術介紹
  堿性磷酸酶染色,又稱Alp染色,是用于檢測骨細胞、骨組織、腎、肝堿性磷酸酶的染色方法,使堿性磷酸酶呈黑色,細胞核呈淺藍色,這是成熟成骨細胞的標志性酶;也可用于肝炎和腎炎的檢測。
  堿性磷酸酶染色實驗流程
  (1)樣本接收:石蠟切片、細胞爬片、冰凍切片
  (2)實驗步驟:脫蠟至水—染液配制-Alp染色-蘇木素淺染核
  (3)實驗結果:染色好的玻片
  alp堿性磷酸酶染色服務注意事項
  1、注意染液要現(xiàn)配現(xiàn)用。
  2、注意切片要用超純水水洗。
  TRAP染色是用于檢測骨組織、骨細胞中特征物質的染色,使破骨細胞呈紅色,背景呈綠色或藍色。抗酒石酸酸性磷酸酶(Trap)為破骨細胞的標志酶,特異地分布于破骨細胞中,為破骨細胞所*,通常作為鑒別破骨細胞的重要標志物。
  TRAP染色服務內容
  1、石蠟切片4~5um,脫蠟至水洗;細胞爬片或者冰凍切片用80%酒精固定后蒸餾水水洗3次,每次3分鐘。
  2、配制六偶氮副品紅溶液
  3、配制孵育液:取1ml六偶氨副品紅加到18ml醋酸鹽溶中,再加入1ml紫酚ASBI磷酸鹽溶液,再加酒石酸鉀鈉        282mg。調pH值5.0,過濾備用;
  4、陰性對照孵育液:取1ml六偶氨副品紅加到18ml醋酸鹽溶中,再加酒石酸鉀鈉282mg。調pH值5.0,過濾備用
  5、切片入37℃蒸餾水水洗30秒;
  6、入孵育液37℃孵育50-60分鐘;
  7、去離子水水洗3分鐘;8、入蘇木素復染40秒;
  9、自來水水洗10分鐘返藍;
  10、甘油明膠封片
  alp堿性磷酸酶染色服務原理
  人血液和造血細胞的堿性磷酸酶pH值為9.4,主要見于中性粒細胞系的成熟階段或晚幼粒細胞。在不同生理狀態(tài)和病理狀態(tài)中均有明顯的改變,具有鑒別診斷意義。
  方法
  目前堿性磷酸酶染色法有改良Gomori法及偶氮偶聯(lián)法 (Kaplow)。
  改良Gomori法原理為: 細胞內堿性磷酸酶水解試劑中的甘油磷酸鈉釋放出無機磷酸鹽,與鈣離子作用生成磷酸鈣,再與鈷離子作用生成磷酸鈷,后與硫化銨生成黑色硫化鈷顆粒,沉淀于細胞漿中。
  偶氮偶聯(lián)法原理為:細胞中堿性磷酸酶在pH 9.5~9.8的緩沖液中,催化α-磷酸萘酚偶聯(lián)成不溶性有色偶氮染料沉淀于細胞漿中。
  結果解讀
  ALP活性僅見于成熟或接近成熟的中性粒細胞。計數(shù)100個中性粒細胞中陽性細胞數(shù),稱陽性率。還可按陽性細胞中的顆粒密度分為1~5級,指數(shù)各為1~5。計算100個中性粒細胞,將每個細胞的指數(shù)相加,其總和稱陽性指數(shù)或積分,作為判斷酶活性的半定量的指標。由于方法及條件的不同,正常差別很大,故每次檢查時應作正常對照。本法的正常值陽性率為60~99%,陽性指數(shù)169~367,平均為274。
 
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