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質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)服務(wù)

更新時間:2024-09-26

簡要描述:

細(xì)胞增殖是指細(xì)胞在周期調(diào)控因子的作用下,通過DNA復(fù)制、RNA轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)合成等復(fù)雜反應(yīng)而進(jìn)行的分裂系列過程。其中核DNA的復(fù)制倍增是整個過程的重要特征。細(xì)胞增殖檢測技術(shù)廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)遺傳學(xué)腫瘤生物學(xué)免疫學(xué)藥理和藥代動力學(xué)等研究領(lǐng)域。

  質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)服務(wù)的質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)(mass cytometry,MC)就是將ICP-MS應(yīng)用到單個細(xì)胞的分析,原理是用純化的單元素同位素標(biāo)記抗體,然后使用ICP-MS檢測該元素離子峰。操作流程簡單,如圖1所示,首先細(xì)胞用帶有金屬元素(一般是鑭系金屬)的特異性抗體標(biāo)記3-4,然后被送入質(zhì)譜流式細(xì)胞儀,細(xì)胞以單個細(xì)胞液滴狀態(tài)被霧化后進(jìn)入高溫等離子體,產(chǎn)生自由原子,四級桿選擇只通過鑭系金屬質(zhì)量范圍內(nèi)的離子,去除其余離子,利用飛行時間質(zhì)譜(TOF mass spectrometry)檢測鑭系金屬離子的相對信號強(qiáng)度。
  傳統(tǒng)流式細(xì)胞術(shù)用熒光基團(tuán)作為報(bào)告分子,通過對發(fā)射光強(qiáng)度定量以確定目標(biāo)分子的表達(dá)量,但熒光基團(tuán)發(fā)射譜常有重合,尤其是在同一個實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行多參數(shù)測量的情況下,難以區(qū)分多個熒光基團(tuán)。質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)使用單一分子量的穩(wěn)定鑭系金屬代替熒光基團(tuán)作為報(bào)告分子,元素質(zhì)譜分析儀能夠通過分子量準(zhǔn)確區(qū)分不同原子質(zhì)量,并且不同鑭系金屬質(zhì)量沒有信號重疊,增加了定量的準(zhǔn)確性。
  目前,質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)可以同時對51個靶蛋白進(jìn)行檢測,每秒檢測1000個細(xì)胞,平均每天可檢測100個樣品,檢測限為100個拷貝分子,已經(jīng)過驗(yàn)證的鑭系金屬標(biāo)記抗體種類超過400種;除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾1,蛋白降解產(chǎn)物5,檢測細(xì)胞存活率,細(xì)胞大小,mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量6,DNA合成速率7以及蛋白酶活性8等的測定。
  多路質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)
  正如蛋白質(zhì)組學(xué)中的非標(biāo)記定量,質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)對靶點(diǎn)的定量準(zhǔn)確性也受到不同儀器離子化效率的差異、儀器狀態(tài)等的影響;同時,傳統(tǒng)的質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)每次只能檢測一個樣品,通量較低。因此,質(zhì)量標(biāo)簽細(xì)胞條碼技術(shù)(mass-tag cellular barcoding,MCB)應(yīng)運(yùn)而生。
  細(xì)胞經(jīng)過藥物等處理后,用多聚甲醛固定后,使用MCB試劑對不同樣本的細(xì)胞進(jìn)行條形碼標(biāo)記,然后將不同樣本混合后進(jìn)行常規(guī)質(zhì)譜流式細(xì)胞分析前處理和檢測。最終通過檢測條形碼對應(yīng)的元素離子,對細(xì)胞進(jìn)行樣品歸類。
 
  質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)服務(wù)應(yīng)用領(lǐng)域
  在醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域的應(yīng)用
  尋找與疾病發(fā)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)相關(guān)的生物標(biāo)志物(早期診斷、伴隨診斷、復(fù)發(fā)預(yù)測)
  免疫系統(tǒng)動態(tài)監(jiān)測,尋找與臨床結(jié)果相關(guān)的生物標(biāo)志物(治療有效人群篩選、藥效分析、預(yù)后評估)
  輔助進(jìn)行疾病分型、分級
  特定人群、部位的免疫特征分析(如孕婦、胎兒、腸道等)
  在藥物研發(fā)領(lǐng)域的應(yīng)用
  臨床前研究:
  藥理學(xué)闡述(先導(dǎo)化合物、激酶抑制劑、抑制劑等)
  藥物對免疫系統(tǒng)的影響分析
  臨床研究:
  臨床試驗(yàn)患者入組優(yōu)化
  聯(lián)合用藥療效分析
  治療后免疫動態(tài)監(jiān)測,尋找與臨床結(jié)果相關(guān)的生物標(biāo)志物
  毓秀生物科技技術(shù)平臺優(yōu)勢
  提供從Panel設(shè)計(jì)到數(shù)據(jù)分析的應(yīng)用完整解決方案
  自有生信分析團(tuán)隊(duì),自主研發(fā)數(shù)據(jù)分析系統(tǒng),滿足客戶個性化的數(shù)據(jù)分析需求
  優(yōu)質(zhì)的項(xiàng)目服務(wù),成熟的實(shí)驗(yàn)流程,嚴(yán)格的質(zhì)控管理
  項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)豐富,涵蓋實(shí)體瘤、血液病、過敏性疾病、心血管病、呼吸系統(tǒng)疾病和風(fēng)濕等多個領(lǐng)域研究
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